Électrophorègramme

Électrophorègramme

Électrophorèse

L’électrophorèse est – avec la chromatographie – la principale des techniques utilisées en biologie pour la séparation et la caractérisation des molécules. Elle a quelques applications en chimie, mais est principalement utilisée en biochimie ou biologie moléculaire pour la séparation des protéines ou celle des acides nucléiques. Dans un milieu donné, la séparation des particules se fait en fonction de leur charge électrique et pour des charges identiques, en fonction de leur taille.

Sommaire

Description

La technique de l'électrophorèse est fondée sur le déplacement d'ions (molécules ayant perdu leur neutralité électrique) sous l'effet d'un champ électrique. Du fait de leurs caractéristiques propres et en fonction des conditions de l'électrophorèse ces ions auront des vitesses de migration différentes, ils vont donc se séparer les uns des autres.

Les molécules anioniques (-) migrent vers l'anode (+) et les molécules cationiques (+) se déplacent vers la cathode (−).

Sur les acides nucléiques, les charges sont portées par les groupements phosphate du squelette.

Sur les protéines, la situation est plus complexe et il existe différents types de groupements ionisables :

La charge nette d'une protéine dépend donc en général de sa composition en acides aminés et du pH.

Électrophorèse en veine liquide

Le champ électrique est fourni par un générateur de courant continu. Le support de ce champ est constitué par un tampon de pH et de concentration convenables dont les ions conduisent le courant d'un pôle à un autre. Ce support peut être liquide : on parle alors d'électrophorèse en veine liquide (mise au point par Tiselius en 1937).

Électrophorèse de zones

Les principales applications utilisent un support poreux stabilisant la phase liquide : on parle alors d'électrophorèse sur support ou d'électrophorèse de zones. Le mélange à séparer est déposé sur un support convenable, poreux et imprégné de tampon (papier, dérivés de cellulose, polyoside « agarose », polyacrylamide…). Le support doit être homogène, poreux et inerte. En fait, la condition d'inertie n'est jamais respectée et le support joue un rôle plus ou moins important dans la séparation.

Les différents types d'électrophorèses de zones sont souvent nommés en fonction du type de support :

Il existe de nombreux types d'électrophorèses, dont :

Gel d'électrophorèse

En biochimie, l'électrophorèse en gel est utilisée pour séparer les macromolécules biologiques en fonction de leur taille et de leur charge électrique. Le gel est constitué d'une matrice de polymère baignant dans un tampon conducteur.

Deux principaux polymères sont utilisés : l'agarose et le polyacrylamide. On peut faire varier la concentration de polymère par rapport à celle du tampon, ainsi que son taux de réticulation. Plus le polymère est concentré et réticulé, et plus la taille des pores du gel est petite. On peut ainsi ajuster les propriétés du gel à la taille des molécules à analyser.

  • L'agarose est utilisé à des concentrations de 0,5% à 2% (poids/volume) et permet de séparer des molécules de très grande taille, principalement de l'ADN ou de l'ARN ;
  • Le polyacrylamide est utilisé à des concentrations de 4% à 20% (poids/volume) et permet de séparer des molécules plus petites : protéines, peptides et des fragments d'acides nucléiques. On peut aussi faire varier sa réticulation (taux de ramification) lors de la polymérisation pour moduler les paramètres de séparation ;

Pour les deux types de polymères, le gel peut se faire en conditions natives ou en conditions dénaturantes. Dans ce second cas, on ajoute un agent dénaturant dans le tampon : un détergent, le SDS pour la séparation des protéines (on parle alors de SDS-PAGE), un agent chaotropique, l'urée, pour les acides nucléiques.

Voir aussi


  • Portail de la biochimie Portail de la biochimie
  • Portail de la biologie cellulaire et moléculaire Portail de la biologie cellulaire et moléculaire
Ce document provient de « %C3%89lectrophor%C3%A8se ».

Wikimedia Foundation. 2010.

Contenu soumis à la licence CC-BY-SA. Source : Article Électrophorègramme de Wikipédia en français (auteurs)

Игры ⚽ Поможем написать реферат

Regardez d'autres dictionnaires:

  • electrophoregramme — elektroforegrama statusas T sritis augalininkystė apibrėžtis Chromatografijos vamzdelio ar plokštelės vaizdas, gaunamas išskyrus sudėtingą molekulių mišinį elektroforezės metu. atitikmenys: angl. electrophoregramme rus. электрофореграмма …   Žemės ūkio augalų selekcijos ir sėklininkystės terminų žodynas

  • electroforegramă — ELECTROFOREGRÁMĂ, electroforegrame, s.f. Diagramă electroforetică a conţinutului proteic din plasma sângelui. – Din fr. électrophorégramme. Trimis de LauraGellner, 12.06.2004. Sursa: DEX 98  ELECTROFOREGRÁMĂ s.f. (med.) Diagrama electroforetică… …   Dicționar Român

  • Abi Prism 310 — Pour les articles homonymes, voir Abi, Prism et 310. L Abi Prism 310 (TM) est un séquenceur de gène monocapillaire produit par la société PerkinElmer. Le mot prism du nom Abi prism 310 fait référence à l existence d un prisme pour diffracter les… …   Wikipédia en Français

  • Abi prism 310 — Pour les articles homonymes, voir Abi, Prism et 310. L Abi Prism 310 (TM) est un séquenceur de gène monocapillaire produit par la société PerkinElmer. Le mot prism du nom Abi prism 310 fait référence à l existence d un prisme pour diffracter les… …   Wikipédia en Français

  • Electrophorese capillaire — Électrophorèse capillaire L électrophorèse capillaire (en anglais capillary electrophoresis : CE) peut être utilisée pour séparer des espèces ioniques selon leur charge et les forces de friction qui s exercent sur elles. En électrophorèse… …   Wikipédia en Français

  • Gel block — Abi prism 310 Pour les articles homonymes, voir Abi, Prism et 310. L Abi Prism 310 (TM) est un séquenceur de gène monocapillaire produit par la société PerkinElmer. Le mot prism du nom Abi prism 310 fait référence à l existence d un prisme pour… …   Wikipédia en Français

  • Électrophorèse capillaire — L électrophorèse capillaire (en anglais capillary electrophoresis : CE) peut être utilisée pour séparer des espèces ioniques selon leur charge et les forces de friction qui s exercent sur elles. En électrophorèse traditionnelle, les éléments …   Wikipédia en Français

  • Amorce (Génétique) — Pour les articles homonymes, voir Amorce. Courte séquence d ARN ou d ADN, complémentaire du début d une matrice, servant de point de départ à la synthèse du brin complémentaire de cette dernière par une ADN polymérase. En PCR, l utilisation d une …   Wikipédia en Français

  • Amorce (genetique) — Amorce (génétique) Pour les articles homonymes, voir Amorce. Courte séquence d ARN ou d ADN, complémentaire du début d une matrice, servant de point de départ à la synthèse du brin complémentaire de cette dernière par une ADN polymérase. En PCR,… …   Wikipédia en Français

  • Amorce (génétique) — Pour les articles homonymes, voir Amorce. Courte séquence d ARN ou d ADN, complémentaire du début d une matrice, servant de point de départ à la synthèse du brin complémentaire de cette dernière par une ADN polymérase. En PCR, l utilisation d une …   Wikipédia en Français

Share the article and excerpts

Direct link
Do a right-click on the link above
and select “Copy Link”